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浓缩胶和分离胶分别发挥的作用。

发表时间:2020-05-19 22:21

  有堆积作用,凝胶浓度较小,孔径较大,把较稀的样品加在浓缩胶上,经过大孔径凝胶的迁移作用而被浓缩至一个狭窄的区带,在电泳的时候可以看到样品被压成一条线、分离胶的作用:

  有分离分子的作用,为电荷效用和分子筛效用。当样品从浓缩胶进入分离胶时,由于蛋白的分子量不一样,其在分离胶中的泳动速度不一样,这样就能够分离目的蛋白,蛋白越大,所对应的分离胶浓度应该越小,比如90k以上的蛋白一般用6%的分离胶来分离。

  分离胶和浓缩胶因为浓度不一样导致孔径不一样,蛋白在其中的泳动速度不一样。

  浓缩胶的浓度通常为3.9%,浓度比较小;浓缩胶中的孔隙较大,起到的作用是为了让蛋白质混合物在进入分离胶之前都到达同一起跑线,以便在分离胶中更好的分开,因此一定要充分跑完浓缩胶之后再调电压。

  分离胶的浓度从6%-15%不等,当样品从浓缩胶进入分离胶时,由于蛋白的分子量不一样,小分子的物质容易通过, 阻力小,迁移速度快;大分子的则受到较大 的阻力而被滞后。这样就能够分离目的蛋白。

  展开全部你是说的在SDS-PAGE里面吧,浓缩胶的浓度比较低(5%丙烯酰胺-甲叉双丙烯酰胺),里面的孔径也比较大,所有的蛋白都能够在进入分离胶之前在同一水平线上(因为在你加样的时候蛋白是分布在加样孔中的,不在同一水平线上,188金宝搏。就像运动员都不在起跑线上一样,无法比较)。分离胶的胶浓度比较大(10%),里面胶孔径也比较小,这样施加电压的时候小的蛋白可以穿过孔跑到下面去,而分子量大的蛋白就可能被拦住,就跑的慢。通过这种方式以分子量大小的区别来分离蛋白质。